Дуплекс-специфическая нуклеаза

- Специфически гидролизует двухцепочечную ДНК
- Термостабильна
- Устойчива к протеиназе К

- Инструкция (pdf, англ.) - Цитирование

Дуплекс-специфическая нуклеаза (ДСН) очищена из гепатопанкреаса камчатского краба с помощью модифицированного протокола, описанного Шагиным и соавт. (Shagin et al., 2002). ДСН – термостабильная нуклеаза, обладающая специфичностью к двухцепочечной (дц) ДНК. ДСН проявляет гидролитическую активность в присутствии ионов двухвалентных металлов (например, Mg2+). ДСН может быть использована для удаления двухцепочечной ДНК из сложных смесей нуклеиновых кислот, например при нормализации образцов кДНК (Zjulidov et al., 2004; 2005) или при определении длины выступающих теломерных концов (Zhao et al., 2008).

КАТ.#	КОЛ-ВО	КОМПОНЕНТЫ НАБОРА	ЦЕНА, РУБ.	ИНСТРУКЦИЯ (pdf, англ.)
Цены действительны на территории Российской Федерации и не включают доставку. Цены у дистрибьюторов могут отличаться от приведенных на сайте. Продукты предназначены только для научно-исследовательских работ, осуществляемых квалифицированным персоналом. Продукты не предназначены для лечения и диагностики заболеваний.
EA001	50 ед. Куница	Лиофилизированная дуплекс-специфическая нуклеаза (ДСН) Буфер для хранения ДСН, 100 мкл 10Х ДСН буфер, 100 мкл ДСН стоп-раствор, 500 мкл Контрольная плазмидная ДНК (0,1 мкг/мл), 20 мкл	14750
EA002	100 ед. Куница		21100
EA003	10 ед. Куница		5600

Хранение: -20°C
Транспортировка: комнатная температура
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки - 1 год.

Измерение активности: Активность ДСН измеряют с помощью модифицированного метода Куница (Kunitz, 1950), где за единицу активности принимают кол-во фермента, которое при добавлении к 50 мкг/мл ДНК из тимуса теленка приводит к увеличению абсорбции раствора на 0,001 единицу за минуту. Измерение активности проводят при 25°C в 50мМ Tris-HCl буфере (pH 7,15), содержащем 5мМ MgCl₂.

Основные свойства ДСН

1. Mg²⁺-зависимая нуклеаза, необходимая концентрация ионов магния для большинства приложений - 5 мМ. Ингибируется в присутствии ЭДТА.
2. Субстратная специфичность: ДНК в ДНК-ДНК (минимальная длина спаренной последовательности субстрата - 9-10 п.о.) и ДНК-РНК гибридах (минимальная длина спаренной последовательности субстрата - 15-20 п.о.)
3. Температурный оптимум: 55-65°С
4. рН оптимум: 7-8
5. рН стабильность: от 4 до 12
6. Устойчива к обработке протеиназой К при обработке при 37°С
7. Температурная стабильность:

	Действие ДСН на оц- (ДНК фага M13) и дц- (ДНК фага λ) ДНК-субстраты. 1, 2 - отрицательный контроль, инкубация ДНК в отсутствие ДСН: (1) ДНК фага M13; (2) смесь ДНК фага M13 и ДНК фага λ. 3; 4 - инкубация смеси ДНК фага M13 и ДНК фага λ в присутствии ДСН при 70°C в течение 1,5 мин (3) и 5 мин (4).