Секвенирование ДНК

- Цитирование

Евроген предоставляет сервис по секвенированию плазмид и ПЦР-фрагментов на автоматическом секвенаторе. При соблюдении оптимальных условий возможно прочтение до 800 нуклеотидов за прогон. Регулярно получаемая дальность прочтения - 500-600 нуклеотидов. Специалисты с многолетним опытом секвенирования: - проведут секвенирование в короткие сроки - помогут вам подобрать правильные праймеры для секвенирования - выделят плазмиды и почистят ПЦР-фрагменты - предоставят отредактированный сиквенс в текстовом формате - в случае, когда нужно прочесть протяженную вставку или ПЦР-фрагмент подберут и синтезируют необходимые праймеры для следующих раундов сиквенса

Результаты секвенирования (хроматограммы и отредактированный текстовый файл) вы получите по электронной почте.

Форма заказа:

Для того чтобы ваш заказ был принят и выполнен в срок, важно, чтобы вместе с образцами мы получили и всю необходимую информацию:

1. ФИО заказчика

2. Адрес электронной почты (на него мы отправим результаты секвенирования)

3. Номер телефона для связи (по нему мы свяжемся с вами, если возникнут какие-либо проблемы)

4. Название организации, которая оплатит заказ (если вы обращаетесь к нам впервые, пришлите, пожалуйста, реквизиты вашей организации)

5. Описание образцов:

Для плазмид
- название вектора, в который клонирован фрагмент
- для вектора, недоступного коммерчески, необходима карта вектора
- размер вставки
- концентрация плазмиды

Для ПЦР-фрагментов
- длина фрагмента
- концентрация ДНК

6. Описание праймеров:

- Для коммерчески доступных векторов указать, с каких праймеров предпочтительно провести секвенирование

- Для специфических праймеров необходим их сиквенс; если у вас уже есть эти праймеры, укажите их концентрацию

7. Укажите нужны ли вам дополнительные услуги по очистке продукта ПЦР, выделению плазмид, дизайну и синтезу праймеров.

8. Укажите в заявке, нужны ли вам услуги курьера, чтобы забрать у вас образцы (услуга платная).

Информацию просим присылать на адрес электронной почты sequence@evrogen.ru

Для получения удовлетворительных результатов мы рекомендуем соблюдать следующие требования к предоставляемым материалам и образцам:

Праймеры

Температура отжига праймера должна находиться в интервале 58-62°С. Мы располагаем набором стандартных праймеров для часто используемых плазмидных векторов. Если вы предоставляете специфические праймеры для секвенирования, нам необходимо знать последовательности и концентрации праймеров. Если у вас нет необходимых праймеров, вы можете заказать любой необходимый для секвенирования праймер в нашей компании.

ВНИМАНИЕ! ПРАЙМЕРЫ К ОБРАЗЦАМ ДОБАВЛЯТЬ НЕ НУЖНО!

Плазмиды

Для постановки одной реакции секвенирования необходимо не менее 6 мкл раствора очищенной плазмиды с минимальной концентрацией 50 нг/мкл для плазмиды длиной 3-5 т.п.н. и 100 нг/мкл для плазмиды длиной 6-9 т.п.н. , для плазмид больших размеров – просьба уточнить необходимые объемы и концентрации. При выделении и очистке плазмид для секвенирования, рекомендуем использовать протокол, приведенный на нашем сайте, воспользоваться коммерческими наборами реактивов для выделения плазмид, или заказать выделение плазмидной ДНК из культуры клеток в нашей компании.

Продукты ПЦР

Для постановки одной реакции секвенирования необходимо не менее 6 мкл раствора, содержащего очищенный целевой продукт с концентрацией 20-50 нг/мкл, в зависимости от длины фрагмента. При очистке продукта ПЦР-реакции рекомендуем использовать коммерческие наборы реактивов или заказать очистку в нашей компании.